2014主管藥師輔導：高效液相色譜法的應用

　　高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又稱(chēng)“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測，從而實(shí)現對試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫學(xué)、工業(yè)、農學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。

　　高效液相色譜法

　　(一)速率理論

　　高效液相色譜法中影響柱效主要因素為渦流擴散項和傳質(zhì)阻抗項。由于液體黏度比載氣大得多，而且柱溫多為室溫，其縱向擴散項很小，可忽略不計。范氏方程簡(jiǎn)化為 H=A +Cμ 。

　　(二)高效液相色譜儀

　　1.高壓輸液泵

　　2.色譜柱：分析型和制備型

　　3.進(jìn)樣閥

　　3.檢測器：①固定波長(cháng)檢測器;②可變波長(cháng)檢測器;③光二極管陣列檢測器

　　(三)應用

　　高效液相色譜法，只要求試樣能制成溶液，而不需要氣化，因此不受試樣揮發(fā)性的限制。對于高沸點(diǎn)、熱穩定性差、相對分子量大(大于400以上)的有機物(這些物質(zhì)幾乎占有機物總數的75%～80%)原則上都可應用高效液相色譜法來(lái)進(jìn)行分離、分析。據統計，在已知化合物中，能用氣相色譜分析的約占20%，而能用液相色譜分析的約占70～80%。

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